樣品溶劑和色譜流動(dòng)相的選擇,2>電離條件的確定,3>氣流的使用。">
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在發(fā)展中求生存,不斷完善,以良好信譽(yù)和科學(xué)的管理促進(jìn)企業(yè)迅速發(fā)展首頁-譜標(biāo)服務(wù)-二手LCMSMS API3000三重四級(jí)桿液質(zhì)聯(lián)用儀操作中的選擇
二手LCMSMS API3000 三重四級(jí)桿液質(zhì)聯(lián)用儀操作中的選擇需注意以下影響因素:
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>樣品溶劑和色譜流動(dòng)相的選擇
采用直接進(jìn)樣方式時(shí),樣品溶劑多選用甲醇、乙睛、異丙醇,乙醇和水等揮發(fā)性溶劑,有時(shí)也可使用少量的氟仿、正丁醇、乙酸乙酯等.樣品的濃度一般為10一100ng/ mL。為了使樣品在溶液中離子化,通常使用揮發(fā)性的酸或堿如乙酸、氯水等調(diào)節(jié)溶液的pH值。
采用分流進(jìn)樣時(shí),對(duì)樣品溶劑的要求不十分嚴(yán)格,但要求色譜流動(dòng)相具有如下特點(diǎn):有一定的導(dǎo)電性,支持離子的形成;較低的表面張力和較小的溶劑化能,利于溶劑蒸發(fā)和樣品離子解吸;調(diào)節(jié)流動(dòng)相性質(zhì)所加人的試劑i添加劑)應(yīng)具有揮發(fā)性。使用ESI接口時(shí),通常選擇甲醇、乙睛.水以及少量的氯仿、乙酸乙酯、丙酮和正丁醇等作為流動(dòng)相,一般情況下使用苯、烷烴、環(huán)烷烴和四氯化碳等溶劑。使用APUI接口時(shí)溶劑的選擇范圍要大一些。此外,流動(dòng)相中常用的pH調(diào)節(jié)劑有甲酸、乙酸和氨水等,常用的緩沖溶液有乙酸銨、甲酸按等常用的HPLC添加劑如磷酸、硼酸及其鹽類,由于不具有摔發(fā)性、表面活性劑和強(qiáng)離子對(duì)試劑等會(huì)嚴(yán)重干擾樣品離子的形成,通常不作為LC-MS流動(dòng)相的添加劑使用。
2>電離條件的確定
噴針的位置對(duì)儀器靈敏度影響很大.分析不同樣品時(shí)應(yīng)將噴針調(diào)節(jié)到不同的良佳位置,以使樣品的募化效果極好,離子化效率相當(dāng)高。一般情況下,直接進(jìn)樣時(shí),噴針的位置參數(shù)通常為(2 ~ 3,2~ 3),分流迸祥時(shí).其中H表示噴針到雛形孔的距寓. L表示噴針噴射的液體在氣簾壁上形成的斑點(diǎn)到錐形孔的距高。應(yīng)當(dāng)絶対避免宜接將溶剤噴入質(zhì)譜僅高真空區(qū)。
分析堿性樣品多采用正離子掃描、分析酸性樣品多采用負(fù)離子掃描。對(duì)于兩種方式都可以分析的樣品,一般 采用負(fù)離子掃描,主要原因在于負(fù)離子掃描儀器噪聲較低,利于樣品的分析電離電壓對(duì)噴霧效果和離子形成有較大影響.通常電離電壓為一3800 ~ 6000V即可使樣品攜帶電荷,負(fù)離子掃描時(shí)電離電壓過高(超過- 3800V)則會(huì)引起氮?dú)怆婋x,影響分析測定:聚焦環(huán)和錐形孔的電壓一般根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行調(diào)節(jié),通常分別為~160V和~50V。這兩處電壓過低易導(dǎo)致儀器靈敏度降低,過高易導(dǎo)致樣品分子在源內(nèi)裂解,使樣品的譜圖復(fù)雜化實(shí)驗(yàn)時(shí)可以通過手動(dòng)優(yōu)化或儀器自動(dòng)優(yōu)化。對(duì)這兩處電壓進(jìn)行最優(yōu)化。
3>氣流的使用
二手LCMSMS API3000
三重四級(jí)桿液質(zhì)聯(lián)用儀
儀器內(nèi)的氣流有以下三種:
1,霧化氣--樣品在高電壓和霧化氣流的作用下產(chǎn)生霧化。
2,氣簾氣-- 在大氣和高真空之間形成-個(gè)氮?dú)獾?,防止溶劑和樣品直接進(jìn)人質(zhì)譜儀高真空區(qū),并利于樣品溶劑的揮發(fā)。
3,輔助加熱氣--與樣品噴射方向成90。,對(duì)難揮發(fā)性容劑,使用加熱氣可以加速醉劑的蒸發(fā)。
二 手LCMSMS API3000三重四級(jí)桿液質(zhì)聯(lián)用儀實(shí)驗(yàn)中根據(jù)樣品和溶劑的揮發(fā)性和流速,選擇氣流的各項(xiàng)參數(shù):應(yīng)注意的是,氣體流速過大易導(dǎo)致離子源源內(nèi)壓力增高.使樣品分子發(fā)生源內(nèi)裂解,過低則導(dǎo)致樣品離子化不完全,降低儀器的靈敏度。在不影響靈敏度的前提下.霧化氣的流速應(yīng)盡量小,氣簾氣的流速應(yīng)盡量大,通常它們的流速分別為6和12(儀器默認(rèn)單位)左右。必要時(shí)。還可打開輔助加熱氣,以獲得更好的霧化效果。該氣流的溫度選擇范圍為200、500,溫度過高會(huì)導(dǎo)致化合物的分解,溫度過低易導(dǎo)致樣品離子化不完全。各種氣流的參數(shù)選擇合適時(shí).儀器靈敏度高,總離子流一時(shí)間圖穩(wěn)定,霧化效果好,噴射斑點(diǎn)清晰可見.沒有明顯液滴沿氣簾壁流下。
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