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首頁-譜標(biāo)服務(wù)-液相色譜儀HPLC(一)紫外可見吸收檢測(cè)器

液相色譜儀HPLC(一)紫外可見吸收檢測(cè)器

發(fā)布時(shí)間:2022-03-11       點(diǎn)擊次數(shù):8903

上篇我們有講到高效液相色譜儀HPLC檢測(cè)器的類型,其中紫外可見吸收檢測(cè)器是液相色譜儀HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測(cè)器。其特點(diǎn)是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對(duì)強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測(cè)限可達(dá)1ng,檢測(cè)后不破壞樣品,可用于制備,并能與任何檢測(cè)器串聯(lián)使用。紫外可見檢測(cè)器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計(jì)相似,實(shí)際上就是裝有流動(dòng)地的紫外可見光度計(jì)。

紫外吸收檢測(cè)器UV檢測(cè)器是液相色譜儀HPLC中最常用的檢測(cè)器,它占液相色譜儀HPLC檢測(cè)器使用率的75%,生產(chǎn)液相色譜的廠家基本都會(huì)配帶這種檢測(cè)器。

紫外吸收檢測(cè)器UV檢測(cè)器特點(diǎn)

● 靈敏度高,最小檢測(cè)量可達(dá)10-9g/mL,也可以檢測(cè)對(duì)于紫外吸收弱的組分;

● 線性范圍寬,大多數(shù)UV檢測(cè)器可以在1.5-2.0AU下保持良好的線性;

● 不易受溫度、流速等因素的影響

● 可用于梯度洗脫

● 可與不同檢測(cè)器串聯(lián)使用,如雙光路雙流路紫外/熒光檢測(cè)器(UV/FLD-1)

紫外吸收檢測(cè)器常用氘燈作光源,氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長(zhǎng),并安裝一個(gè)光柵型單色器,其波長(zhǎng)選擇范圍寬(190nm~800nm)。它有兩個(gè)流通池,一個(gè)作參比,一個(gè)作測(cè)量用,光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過純的均勻溶劑,則它們?cè)谧贤獠ㄩL(zhǎng)下幾乎無吸收,光電管上接受到的輻射強(qiáng)度相等,無信號(hào)輸出。當(dāng)組分進(jìn)入測(cè)量池時(shí),吸收一定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強(qiáng)度不等,這時(shí)有信號(hào)輸出,輸出信號(hào)大小與組分濃度有關(guān)。

局限:流動(dòng)相的選擇受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動(dòng)相,每種溶劑都有截止波長(zhǎng),當(dāng)小于該截止波長(zhǎng)的紫外光通過溶劑時(shí),溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢測(cè)器的工作波長(zhǎng)不能小于溶劑的截止波長(zhǎng)。

總結(jié)紫外吸收檢測(cè)器的優(yōu)點(diǎn)、缺點(diǎn)
基于試樣組分對(duì)特定波長(zhǎng)紫外可見光的選擇性吸收,組分濃度與吸光度成正比

1. 優(yōu)點(diǎn)
① 靈敏度高,其最小檢測(cè)量10-9g/mL;
② 線性范圍寬;
③ 可用于梯度洗脫;
④ 波長(zhǎng)可選,易于操作;
⑤ 可與任何檢測(cè)器串聯(lián)使用

2. 缺點(diǎn)
① 對(duì)紫外光完全不吸收的試樣不能檢測(cè);
② 溶劑的選擇受限制

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TEL:400-800-3875